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确定细胞转染效率的高低非常重要,通过特异的核酸转染指示剂转染进入细胞核并结合两种染料,可以精确定量地分析转染效率及细胞毒性。
riboMONITOR®转染指示剂试剂盒包含3种染料:riboTRACER™ Green、NUCLEOstain™和DEADstain™,分别是用于检测成功转染细胞、全部细胞和死亡细胞。其中riboTRACER™ Green能够在转染后富集于细胞核,不依赖于siRNA或miRNA序列,可方便、快速、准确地定量分析细胞转染效率,以便对siRNA或miRNA转染条件做进一步优化。
产品介绍


riboMONITOR®试剂盒内含3种荧光物质,精确定量转染效率仅需3步

产品优势

1、使用方便:仅需3步,荧光显微镜观察即可
2、准确定量:富集于细胞核,精确定量转染效率
3、毒性分析:可同时分析细胞毒性,优化转染试剂用量

哪种转染试剂适合您?
锐博生物提供从siRNA/miRNA、mRNA/长链RNA到蛋白质的全系列转染试剂,请根据下表确定适合您的转染试剂。
siRNA/miRNA/质粒转染试剂,基因抑制效率高mRNA/长链RNA转染试剂,适用于原代细胞蛋白质转染试剂,可实现高效转染
riboFECT™ CP转染试剂riboFECT™ mRNA转染试剂riboFECT™ Protein转染试剂
试剂规格0.5ml, 1ml0.5ml, 2.5ml0.5ml, 2.5ml
样品类型siRNA, miRNAmRNA, 长链RNA蛋白质
转染效率很好很好高达98%
细胞活力很好很好
细胞毒性超低超低几乎无细胞毒性
转染细胞系(部分)HeLa,A549,HEK293T,HCT-116,NIH/3T3,HepG2,HNE1,
L6,5637,H-bc,HSC,C2C12,Sertoli,CNE-2,5-8F,
HAEC,DRG,CF,THP-1,MEL,PBMC,NSC,MSC,U2OS
human fibroblasts,CHO-K1,B16-F10,HEK293HEK293,B16-F10,COS-7,COLO 205,dendritic cells (DC),
H9c2,human fibroblasts (primary cells),HUVEC (primary cells),
Jurkat,MC3T3-E1,MEF (primary cells),microglia,
mouse podocytes (primary cells),NIH/3T3,SK-OV-3,U-373 MG
技术支持

评价实验细胞系转染的难易度

不同细胞系的转染效率差异很大,如何鉴定目的细胞系是否适合转染是细胞转染实验的基本问题。通常用荧光标记的siRNA或miRNA进行相应的转染对照试验,但该类转染对照不均匀地分布于细胞各处,有时甚至会粘连成团,很难定量分析细胞的转染效率。riboTRACER™是细胞核富集的核酸指示剂,通过与细胞核染料结合,即可精确定量分析细胞转染效率和细胞毒性。

图1 使用riboMONITOR®检测riboFECT™ CP转染siRNA于不同细胞系的转染效率

Cells transfected with riboTRACER™ Green (100nM) with riboFECT™ CP (5 µl/well), fixed with PFA, stain with NUCLEOstain™ and DEADstain™, 20X of microscope.

评价转染试剂的转染效果与细胞毒性

不同的转染试剂的转染效果差别很大,不恰当地选择转染试剂使转染效率低下,甚至导致细胞的大量死亡。riboMONITOR®通过荧光定量检测成功转染的细胞、死亡细胞、全部细胞,实现了细胞转染效率和细胞毒性的同时评估。
图2 使用riboMONITOR® 转染指示剂检测3种转染试剂转染293T细胞的转染效果
Reagent L的转染试剂细胞毒性较大,易引起细胞大量死亡,Reagent X转染试剂的转染效率不高。而riboFECT™ CP的转染效率较高,几乎无细胞毒性,能够顺利转染293T细胞。

优化转染条件,监测转染效果

转染试剂用量和细胞密度是转染实验成功的关键,确保转染效果的批次间的稳定性,是实验可重复性的重要保证。riboMONITOR® 通过结合细胞核染料,可快速检测出细胞的转染效率,优化最佳的转染试剂用量及细胞密度,确定最适宜的转染条件,以实现细胞的高效转染,减少实验中不必要的实验摸索
A-B:采用0.4µl和1µl的Reagent L转染Hela细胞的转染效果及细胞毒性检测;C-D:采用0.4µl和1µl的Reagent L分别进行4万和5万细胞的转染实验,结果表明采用1µl Reagent L,4万细胞进行转染时转染效率最高(C),细胞毒性最小(D)

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产品编号 产品名称 目录价数量操作
C10410-1 riboMONITOR Transfection Indicator Kit(Green ),20T ¥800.00
C10410-2 riboMONITOR Transfection Indicator Kit(Green ),40T ¥1,300.00
C10410-5 riboMONITOR Transfection Indicator Kit(Green ),100T ¥2,400.00

 

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