Ribo™ T7 mRNA转录试剂盒
Ribo™ T7 mRNA转录试剂盒
真核生物mRNA的5’端帽子结构和3’端 poly(A)尾是mRNA的必要结构元件,对mRNA在体内或细胞内的稳定性、翻译效率及免疫原性有重大影响。传统的mRNA体外合成一般需要先转录、再进行加帽和加尾,步骤较为繁琐。本试剂盒可使用含有T7启动子序列、AGG起始序列、mRNA编码序列和poly(A)尾序列的DNA模板进行体外转录反应,一步反应即可合成带有帽结构类似物Ribo-Cap1和poly(A)尾的成熟mRNA,大大简化体外制备mRNA的反应和质控检测步骤,并能获得更高的加帽率和转录效率。此方法合成的mRNA 能够减低RNA产生先天性免疫反应,可用于显微注射、转染、体外翻译、mRNA疫苗临床前研究等下游应用。。
此外,本试剂盒还可根据需求对单个或多个核苷酸单体进行替换,制备特殊化学修饰的mRNA。转录合成的mRNA可用于
显微注射、转染、体外翻译、mRNA疫苗临床前研究等下游应用。
产品优势
■ 操作简便:采用帽结构类似物Ribo-Cap1,仅需一步共转录加帽即可完成Cap1 mRNA的合成
■ 加帽率高:一步法共转录产物的加帽率可稳定在90%以上
■ 产量高:与抗反帽ARCA相比,Ribo-cap1与GTP无竞争,不影响RNA的产率,针对长度300-5000nt的转录本,
1μg模板投入量可产生70-150μg的mRNA
■ 表达效率高:带有天然Cap1帽的mRNA相较于Cap0帽修饰在真核生物中具有更高的表达效率,并可减少先天免疫刺激
技术支持
示例 01
使用RiboTM RNAmax T7共转录RNA合成试剂盒合成长度1300nt的mRNA,并检测mRNA的完整性及大小。结果显示
在1000-2000nt处出现了明显的条带,使用安捷伦2200 TapeStation检测到合成的mRNA大小为1312nt。
示例 02
使用RiboTM RNAmax T7共转录RNA合成试剂盒合成长度为4000nt的mRNA,20μL反应体系中加入1μg DNA模板,
并检测不同时间点的mRNA产量。结果显示RNA产量通常在2h左右就趋于稳定。
示例 03
使用帽类似物Ribo-Cap1加帽,并通过高效液相色谱分析mRNA的加帽率。结果显示使用Ribo-Cap1共转录加帽生成的mRNA,其加帽率达到96%。
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产品编号 | 产品名称 | 目录价 | 数量 | 操作 |
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C11080-1 | RiboTM-T7 mRNA Transcription Kit (20T) | ¥5,680.00 |
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