PCR样品准备须知
请根据样品类型采用相应的操作：
一) 样品处理
A. RNA样品：取10µg总RNA，并提供RNA质量检测图。要求浓度在500ng/µl以上，体积在20µl以上，OD260/OD280的比值在1.8至2.0之间，电泳检测28s的亮度约为18s的两倍。-80℃贮存，干冰运输。
B. 组织样品：请将200mg以上的组织样本，并用冻存管分装为两管，做好标记。-80℃或者液氮贮存，干冰运输。
C. 血液样品：请提供至少2mL血样，并在2小时内处理完毕后加入Trizol，并做好标记。
1）全血：采集新鲜血液，建议QIAamp RNA Blood Mini Kit等全血样品RNA提取试剂盒抽提RNA，或者新鲜血液分离白细胞；处理后的样本放入干冰或者﹣80℃冰箱保存，干冰运输。
2) 血浆：用EDTA等抗凝剂处理后的样本，4℃ 4000rpm离心5分钟，上层为血浆样本，按每200µl血浆样本加入1ml Trizol的比率加入足量Trizol，涡旋摇匀，放入干冰或者-80℃冰箱保存，干冰运输。
3) 血清：用非抗凝管收集血样，静置分离上层血清，按每200uL血清加入1ml Trizol的比率加入足量Trizol，涡旋摇匀，放入干冰或者-80℃冰箱保存，干冰运输。
D. 细胞样品：
a. 贴壁细胞
1) 贴壁细胞培养或处理结束后，去除培养液，预冷PBS清洗一次；
2) 按每10 cm2 培养面积加1 mL Trizol试剂的比例加入Trizol试剂摇匀，保证所有细胞接触到Trizol而被充分消化；
3) 用1 ml枪头反复吹打，并将Trizol细胞悬液转移至RNAase-free 的EP管中，并做好标记；
4) 放入干冰或-80℃冰箱中保存，干冰运输。
b. 悬浮细胞
1) 悬浮细胞培养或药物处理结束后，离心去除培养液；
2) 所收集的细胞用预冷PBS 缓冲液快速清洗一次，离心除去PBS 缓冲液；
3) 按照每5×106 个细胞加1 mL Trizol的比例加入Trizol试剂，涡旋振荡使细胞充分悬浮，并做好标记；
4) 放入干冰或-80℃冰箱中保存，干冰运输。
注：提供B、C、D类样品需支付￥60/样品的前期处理费用。
二) 样品信息卡
1) 请仔细填写《PCR样品信息卡》，提供样品编号、数量、处理方式等信息。
2) 如果提供RNA，请同时提供RNA质量检测相关数据和图片，包括分光光度、电泳胶图或Nanodrop仪器检测数据。
注：样品信息卡信息应与合同上标记信息相同，否则应该详细列出一一对应表格。
三) 样品包装与标记
1) 建议使用1.5ml离心管包装样品，并且用封口膜密封。
2) 并在各样品管上做好清晰的标识。
a.最好在管上和管盖都用黑色Marker笔写明样品标识；
b.另在标签纸上也写上标识，贴在管壁；
注：管上的标识要与样品信息卡上的标识完全相同。
四) 样品运输
1) RNA样品，DNA样品请用干冰运输。
2) 细胞样品，组织样品，均用干冰运输。
注：干冰运输时间尽量不要超过72小时。
