In vivo siRNA最关键的问题就是siRNA稳定性及给药策略，适当的化学修饰是解决siRNA稳定的重要方法之一。锐博生物研发的genOFFTM in vivo siRNA，采用特殊的化学修饰方式，大大提高了siRNA的血清稳定性，并保持了siRNA的高效活性；通过采用国际先进的处理方法，能够最大限度降低对实验动物的毒性。
In vivo siRNA给药方法大致分为系统给药（如静脉给药、腹腔给药等）和局部给药（如皮下注射，玻璃体给药，鞘内给药等）。siRNA系统给药每次注射5~20nmol/20g体重，局部给药则需每次注射1~5nmol/20g体重, 给药频率往往是一周2~3次，也可根据实验方案灵活设定给药剂量和频次，探索更佳的实验条件。
首先需要根据动物模型和实验方案，确定给药量和给药次数，然后计算出实验所需的总用量。需要根据不同的器官来选择给药方法，而给药量因不同给药方法和实验目的而异。如肝脏、肾脏、肌肉等常用静脉注射（系统给药）；而皮下肿瘤则常用到瘤内注射（局部给药）。
局部给药（Local administration）
适用范围：浅表器官和组织，包括眼、肺、脑、肌肉、皮下组织、叶鞘组织等。
特点：最直接最常用的导入方式，siRNA 的导入效率较高，用量少，siRNA 能很快被吸收。因此，genOFFTM in vivo siRNA 在局部注射的应用中更有优势。
系统给药（Systemic administration）
适用范围：siRNA 具有广泛的组织分布，包括心、肝、肾、肺等。
特点：一些无法通过局部给药方式到达的靶位，如深入的内脏器官和一些散在分布的靶位（如淋巴细胞，转移性肿瘤细胞等），一般使用系统注射方式。
小编之前已经给大家整理一些关于动物用siRNA产品的客户应用案例，详情请见：
动物用siRNA案例应用策略解析(20210609)丨含动物造模、实验处理、给药方式、给药剂量……
本期文章小编给大家更新了几篇关于in vivo siRNA给药方式的客户应用案例，希望能够对正在或即将要做动物实验的各位小伙伴有一定的帮助！
应用案例1：
Cell Death & Differentiation（IF15.822）丨LncRNA NEAT1 controls the lineage fates of BMSCs during skeletal aging by
impairing mitochondrial function and pluripotency maintenance
研究模型：老年性骨质疏松症（选择18个月大的老龄小鼠作为动物研究模型）
动物模型：18月龄C57BL/6小鼠（随机分为3组，分别注射si-NC、si-Neat1、PBS）
给药方式：尾静脉注射
给药剂量：100nM
给药频率：每周注射1次，注射6周
Fig1. si-Neat1递送可防止老年小鼠的骨质流失和骨髓脂肪堆积
参考文献：Zhang H, Xu R, Li B, et al. LncRNA NEAT1 controls the lineage fates of BMSCs during skeletal aging by impairing mitochondrial function and pluripotency maintenance[J]. Cell Death & Differentiation, 2021: 1-15.
应用案例2：
Molecular Therapy（IF11.454）丨Long noncoding RNA lnc-POP1-1 upregulated by VN1R5 promotes cisplatin resistance in head
and neck squamous cell carcinoma through interaction with MCM5
研究模型：头颈部鳞状细胞癌（将1×107 HNSCC肿瘤细胞皮下注射到小鼠右侧，构建异种移植小鼠模型，小鼠在肿瘤接种后第6、9、12、15和18天腹腔注射5mg/kg顺铂，当肿瘤大小长到5mm×5mm，瘤内注射siRNA或ASO）
动物模型：肿瘤异种移植小鼠模型（分为4组，分别注射si-NC、si-MCM5、si-MCM5+ASO-NC、si-MCM5+ASO-lnc-POP1-1）
给药方式：瘤内注射
给药剂量：10nmol
给药频率：每3天注射1次，注射5次
Fig2. 注射si-MCM5或ASO-lnc-POP1-1与si-MCM5可导致小鼠的肿瘤体积和重量显著下降
参考文献：Jiang Y, Guo H, Tong T, et al. Long noncoding RNA lnc-POP1-1 upregulated by VN1R5 promotes cisplatin resistance in head and neck squamous cell carcinoma through interaction with MCM5[J]. Molecular Therapy, 2021.
应用案例3：
Molecular Therapy-Nucleic Acids（IF8.886）丨circRNA-DURSA regulates trophoblast apoptosis via miR-760-HIST1H2BE axis in
unexplained recurrent spontaneous abortion
研究模型：自然流产（选择6-8周龄的ICR小鼠，即雌性小鼠与雄性小鼠交配，选择雌性小鼠作为动物研究模型）
动物模型：体内妊娠ICR雌性小鼠模型（分为两组，分别注射si-circRNA-DURSA和 NC）
给药方式：子宫角腔注射
给药剂量：10 nmol
给药频率：雌性小鼠在看到栓子后第4天注射
Fig3. 注射si-circRNA-DURSA到体内妊娠ICR小鼠中可抑制体内胚胎植入和胎盘形成
参考文献：Tang M, Bai L, Wan Z, et al. circRNA-DURSA regulates trophoblast apoptosis via miR-760-HIST1H2BE axis in unexplained recurrent spontaneous abortion[J]. Molecular Therapy-Nucleic Acids, 2021.
应用案例4：
Cell Death & Disease（IF8.462）丨SESN2 protects against denervated muscle atrophy through unfolded protein response and
mitophagy
研究模型：肌萎缩（选择10周龄雄性C57BL/6 J小鼠，对小鼠右后腿进行去神经手术，构建去神经雄性C57BL/6 J小鼠模型，用于制备PERK和C/EBPβ敲低小鼠模型）
动物模型：去神经雄性C57BL/6 J小鼠模型（分为两组，分别注射PERK和C/EBPβ siRNA、NC对照）
给药方式：腓肠肌注射
给药剂量：10 nmol
给药频率：每3天注射1次
Fig4. 注射PERK和C/EBPβ siRNA以构建PERK和C/EBPβ敲低模型，在去神经GAS中进一步验证了PERK-C/EBPβ轴对SESN2表达的影响
参考文献：Yang X, Xue P, Yuan M, et al. SESN2 protects against denervated muscle atrophy through unfolded protein response and mitophagy[J]. Cell death & disease, 2021, 12(9): 1-13.
应用案例5：
Cell Death & Disease（IF8.462）丨Sulfiredoxin-1 attenuates injury and inflammation in acute pancreatitis through the ROS/ER
stress/Cathepsin B axis
研究模型：急性胰腺炎（购买C57BL/6J小鼠，安置在无病原体的环境中，小鼠经尾静脉注射Srxn1 siRNA或NC对照，最后一次siRNA注射后2天注射雨蛙素以诱导急性胰腺炎AP模型）
动物模型：C57BL/6J小鼠模型（分为两组，分别注射Srxn1 siRNA、NC对照）
给药方式：尾静脉注射
给药剂量：20 nmol
给药频率：每周2次，共4周
Fig5. 注射Srxn1 siRNA加重了雨蛙素诱导的急性胰腺炎
参考文献：He J, Ma M, Li D, et al. Sulfiredoxin-1 attenuates injury and inflammation in acute pancreatitis through the ROS/ER stress/Cathepsin B axis[J]. Cell Death & Disease, 2021, 12(7): 1-11.
应用案例6：
Cell Death & Disease（IF8.462）丨Leukemia inhibitory factor regulates Schwann cell proliferation and migration and
affects peripheral nerve regeneration
研究模型：神经损伤（成年SD大鼠在麻醉后进行坐骨神经挤压损伤以构建坐骨神经挤压损伤SD大鼠模型）
动物模型：坐骨神经挤压损伤SD大鼠模型（分为两组，分别注射LIF-siRNA [siRNA-1]、NC对照）
给药方式：神经损伤部位（左后爪）注射
给药剂量：5ul
给药频率：神经挤压伤后1周、2周和3周注射
Fig6. 注射LIF-siRNA可刺激神经功能恢复
参考文献：Chen Q, Liu Q, Zhang Y, et al. Leukemia inhibitory factor regulates Schwann cell proliferation and migration and affects peripheral nerve regeneration[J]. Cell death & disease, 2021, 12(5): 1-14.
应用案例7：
Oxidative Medicine and Cellular Longevity（IF6.543）丨Hydromorphone Protects against CO 2 Pneumoperitoneum-Induced
Lung Injury via Heme Oxygenase-1-Regulated Mitochondrial Dynamics
研究模型：肺损伤（小鼠称重并通过腹腔内注射剂量为40mg/kg的1%戊巴比妥钠进行麻醉。麻醉稳定后，将Microrenathane导管插入每只小鼠的股动脉。然后，将动脉导管连接到传感器以监测股动脉平均动脉压。根据预实验结果，在气腹建立前15分钟，通过腹腔注射将总共120μg（10μl）氢吗啡酮（HR组）或0.9% NS（10μl）（P组）缓慢注射到小鼠体内。然后，通过将Veress针插入腹腔，并通过Wisap CO2气体吹入器吹入CO2，建立气腹。使用吹入器将腹内压设置为15 mmHg进行吹气（1 h）和CO2放气（3 h）。小鼠吸入CO2后出现中度腹胀，表明模型建立。对照组（C组）未建立气腹）
动物模型：气腹诱导的肺损伤C57BL/6小鼠模型（分为两组，分别注射HO-1-siRNA、NC对照）
给药方式：尾静脉注射
给药剂量：/
给药频率：实验干预前48h注射
Fig7. 注射HO1-siRNA的小鼠中，氢吗啡酮对气腹诱导的肺损伤的保护作用消失
参考文献：Shi J, Du S H, Yu J B, et al. Hydromorphone Protects against CO2 Pneumoperitoneum-Induced Lung Injury via Heme Oxygenase-1-Regulated Mitochondrial Dynamics[J]. Oxidative medicine and cellular longevity, 2021, 2021.
更多动物用siRNA应用案例持续更新中，敬请期待……
